Phương pháp định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí trong Thực Phẩm – Công ty TNHH Quốc tế PTC Việt Nam

1. Vi khuẩn hiếu khí là gì ?

Vi sinh vật hiếu khí là những vi sinh vật cần oxy phân tử để sống sót và tăng trưởng, hình thành nên khuẩn lạc khi nuôi cấy. Nhưng lại nhu yếu lượng Xác Suất oxy trong thiên nhiên và môi trường sống ít hơn trong khí quyển thường thì .

Hiện nay, hàng loạt vụ ngộ độc thực phẩm, đồ uống từ mức độ nghiêm trọng ít đến mức độ cực kỳ nghiêm trọng xảy ra và đây chính là nguyên do tác động ảnh hưởng trực tiếp đến sức khỏe thể chất của người tiêu dùng và tiềm ẩn nhiều rủi ro tiềm ẩn bệnh tật nguy hại về lâu về dài .

Đây cũng là một trong những chỉ tiêu trong kiểm tra vệ sinh thực phẩm trong quá trình sản xuất, vận chuyển và bảo quản. Chỉ tiêu này được xác định bằng phương pháp đếm khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch dinh dưỡng; thể diện dưới dạng số đơn vị hình thành khuẩn lạc (colony forming unit, CFU) trong một đơn vị khối lượng hay thể tích thực phẩm.

2. Phương pháp định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí bằng việc nuôi cấy trên bề mặt thạch

Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm hoàn toàn có thể được xác lập bằng giải pháp nuôi cấy trên mặt phẳng thạch. Hoặc giải pháp hộp đổ trải qua số lượng khuẩn lạc đếm được trên đĩa petrifilm .
Các chiêu thức này được cho phép xác định lượng vi sinh vật có năng lực sinh trưởng trong thiên nhiên và môi trường mẫu bắt đầu. Ngoài ra, lúc bấy giờ còn có những vật tư, dụng cụ tương hỗ kiểm tra tổng số vi khuẩn hiếu khí nhanh hơn như đĩa petrifilm, dipslide, …

Các bước thực hiện :

• Mẫu thực phẩm được cắt nhỏ hoặc sử dụng thiết bị dập mẫu vô trùng cho tới khi được đồng nhất,
• Cân chính xác 10g (hoặc 10ml) thực phẩm đã được chuẩn bị cho vào bình tam giác có chứa 90ml đệm pepton. Sau đó, lắc đều 2 – 3 phút thu được dung dịch mẫu thử ở 10-1
• Hút 1ml dung dịch mẫu thử ở 10-1 sang ống nghiệm có chứa sẵn 9ml đệm pepton. Sau đó, lắc đều 2 – 3 phút, thu được dung dịch mẫu thử 10-2. Tiếp tục làm tương tự để có dung dịch pha loãng tiếp theo. Sử dụng máy pha loãng trọng lượng để tăng độ chính xác, tốc độ, độ vô trùng xử lý mẫu

Thiết bị dập mẫu vô trùng IUL

Đổ đĩa và ủ mẫu

Sử dụng môi trường PCA để nuôi cấy vi sinh vật hiếu khí

• Dùng pipet hút 1ml mẫu thử cho vào đĩa petri, sau đó đổ 10 – 15ml môi trường đã pha vào đĩa
• Xoay nhẹ đĩa petri theo hai chiều trái, phải để trộn đều mẫu
• Để thạch đông, lật ngược đĩa và ủ ấm ở 370C trong thời gian 24-72 giờ

Đếm khuẩn lạc

Sau thời gian ủ, thực hiện đếm khuẩn lạc, có thể đếm bằng mắt thường hoặc máy đếm khuẩn lạc

Máy đếm khuẩn lạc bằng tay thủ công
Sử dụng thiết bị đếm khuẩn lạc thủ công bằng tay để đêm khuẩn lạc vi khuẩn hiếu khí mọc, tính số lượng khuẩn lạc theo công thức

Trong đó:

N là số tế bào vi khuẩn trong 1 g hay 1 ml mẫu ( CFU : colony forming units )
C : Tổng số khuẩn lạc đếm được trên những hộp petri đã chọn ( khoảng chừng từ 25 – 250 khuẩn lạc / đĩa )
Ni : số hộp petri cấy tại độ pha loãng thứ nhất
di : thông số pha loãng tương ứng
v : thể tích dịch mẫu ( ml ) cấy vào trong mỗi đĩa

Để rút ngắn thời gian trả kết quả, tăng độ chính xác và đáp ứng nhu cầu vi sinh hiện đại, PTN sử dụng thiết bị đếm khuẩn lạc tự động 

Thiết bị đếm khuẩn lạc tự động IUL

Đếm khuẩn lạc tự động IUL, giúp KTV tăng độ chính xác và giảm thời gian làm việc, thiết bị đáp ứng tiêu chuẩn CFR21 Part 11, kết quả được trả vài giây, dễ dàng xuất kết quả báo cáo.

Source: https://suachuatulanh.edu.vn
Category : Sức Khỏe